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Genetische Chemie
Polymerase-Kettenreaktion (PRC)
Polymerase-Kettenreaktion (PCR)
Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) ist eine weit verbreitete molekularbiologische Technik zur Amplifikation von DNA-Sequenzen. Bei PCR-Experimenten ist die Wasserqualität für verschiedene Schritte von entscheidender Bedeutung, einschließlich der Matrizenvorbereitung, der Herstellung von Primer- und Nukleotidlösungen sowie der PCR-Reaktion selbst. Hochreines Wasser ist unerlässlich, um Störungen bei der DNA-Amplifikation zu verhindern und den Erfolg von PCR-Experimenten sicherzustellen.
Was ist der Einfluss von Wasser bei der PCR?
Die Wasserqualität beeinflusst den Erfolg und die Zuverlässigkeit von PCR-Experimenten erheblich. Verunreinigtes Wasser kann zu Verunreinigungen in DNA-Proben führen, die Genauigkeit der DNA-Polymerasen beeinträchtigen und die Genauigkeit der DNA-Amplifikation beeinträchtigen. Hochreines Wasser ist erforderlich, um die Integrität der DNA-Templates aufrechtzuerhalten und zuverlässige PCR-Ergebnisse zu gewährleisten.
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Welche Arten von Verunreinigungen im Wasser können die PCR beeinflussen?
Zu den Wasserverunreinigungen, die sich auf PCR-Experimente auswirken können, gehören:
Bakterien und Mikroorganismen
Auswirkung:
Eine bakterielle Kontamination kann die PCR-Ergebnisse beeinträchtigen.
Auswirkung:
Unbeabsichtigte Mikroorganismen können zu Variationen in den PCR-Proben führen, was zu Inkonsistenzen bei den Versuchsbedingungen führt und die Zuverlässigkeit von PCR-Analysen beeinträchtigt. Dies kann die Genauigkeit der DNA-Amplifikation beeinträchtigen.
Endotoxine
Auswirkung:
Endotoxine können die Effizienz von PCR-Reaktionen beeinflussen.
Auswirkung:
Bei PCR-Experimenten können Endotoxine den Amplifikationsprozess stören, was zu Schwankungen der Reaktionseffizienz führt und die Zuverlässigkeit der PCR-Ergebnisse beeinträchtigt. Dies kann die Genauigkeit der DNA-Amplifikation und -Quantifizierung beeinträchtigen.
Organische Verbindungen
Auswirkung:
Kleine organische Verbindungen in Wasser können bei PCR-Assays unerwünschte Signale auslösen.
Auswirkung:
Organische Verunreinigungen wie Huminsäuren und Pestizide können die Reinheit von PCR-Proben beeinträchtigen. Die Entfernung dieser organischen Verbindungen aus den PCR-Puffern ist entscheidend, um genaue und zuverlässige Amplifikationsergebnisse zu gewährleisten.
Ionische Verunreinigungen
Auswirkung:
Ionische Verunreinigungen können die PCR-Amplifikation stören.
Auswirkung:
Erhöhte Ionenwerte können die Spezifität und Effizienz von PCR-Reaktionen beeinflussen und zu Schwankungen der Amplifikationsergebnisse führen. Die Aufrechterhaltung niedriger Konzentrationen ionischer Kontaminanten ist für die Reproduzierbarkeit und Genauigkeit von PCR-Analysen unerlässlich.
Anforderungen an die Wassermessung für PCR
Bei PCR-Anwendungen hängt die Erzielung genauer und reproduzierbarer Ergebnisse von der Qualität des für die Analyse verwendeten Wassers ab. Die Auswahl des Wassers richtet sich nach der Empfindlichkeit der verwendeten PCR-Methoden. Für Techniken, die eine hohe Spezifität erfordern, wie z. B. die quantitative PCR (qPCR), wird die Verwendung von apyrogenem Reinstwasser vom Typ I dringend empfohlen.
Wasserqualitätsstandards gemäß Industrierichtlinien:
Die Einhaltung dieser Wasserqualitätsstandards ist entscheidend für den Erfolg und die Genauigkeit von PCR-Experimenten. Wasser vom Typ I wird für kritische PCR-Anwendungen empfohlen, während Wasser vom Typ II für Routineexperimente geeignet sein kann.
ANMERKUNGEN:
Anwendungen, die eine Endotoxinfiltration erfordern, sollten einen CLF-5000-02E-Endfilter zur Endotoxinentfernung erwerben.
System
Etikett
Systemtiefe (Zoll)
Systemhöhe (Zoll)
Systembreite (Zoll)
Trockengewicht (lbs)
Einlassanschluss
Systemspannung
TOC-Überwachung
0,05μ-Ultrafiltration
Ultraviolette Oxidation
Reinheit des Abwassers
Abfließende Mikroorganismen
Abfließendes Natrium
Abfließendes Chlorid
Abwasser TOC
Maximaler Systemwert
Leistung (lpm)
Volumetrische Voreinstellungen
Montage
Anwendungen im Labor
Kategorie
System
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0,05μ-Ultrafiltration
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Kategorie
CLïR 3400 High Purity Lab Water System with 0.05 Micron Ultrafiltration and UV
10
25.25
21
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⅜" O.D. Tubing
120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 10 CFU / ml
< 1ppb
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< 5 ppb
4
Countertop, Wall Mount
DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 120v)
14.4
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120V/60Hz
> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
< 1ppb
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DNA Sequencing, Forensics, Genetics, Molecular Biology, Polymerase Chain Reaction (PCR)
Genetic Chemistry
CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 220v)
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> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
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CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Standard 120v)
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CLïR 3400 High Purity Lab Water System with 0.05 Micron Ultrafiltration and UV
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> 18 MΩ/cm
< 10 CFU / ml
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CLiR 5400 Ultrapure Lab Water System with TOC Monitoring, UV Disinfection & Ultrafiltration (Remote 120v)
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> 18 MΩ/cm
< 1 CFU/ml
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< 1 CFU/ml
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